缺 血 前 缺血30min 缺血60min 再灌注30min 再灌注60min MDA(μmol/l)
CAT(U/gHb)
SOD(NU/ml)
GSH-PX(mmol/L)3.646±0.3308.152±0.623
143.54±15.97
0.362±0.0533.898±0.3067.922±0.576
136.62±20.09
0.339±0.0444.080±0.325*7.713±0.562
136.77±12.57
0.334±0.0625.070±0.321#7.599±0.527
133.16±13.54
0.265±0.057#5.548±0.579#7.471±0.516*
126.35±15.96*
0.201±0.050#注:#与其它四个时间点比较P<0.05;*与缺血前比较P<0.05。 2 血浆CAT活性的变化
对照组各个时间点自身比较差异均无显著性。实验组结果见表1。CAT活性随缺血和再灌注的时间延长而逐渐降低。但仅再灌注60min较缺血前比差异有显著性(P<0.05),其他各时间点比均无显著差异(P>0.05)。
3 血浆SOD活性的变化
对照组各个时间点自身比较差异均无显著性。实验组结果见表1。SOD活性随缺血和再灌注的时间延长而逐渐降低。但仅再灌注60min较缺血前比差异有显著性(P<0.05),其他各时间点比均无显著差异(P>0.05)。
4 血浆GSH-PX活性的变化
对照组各个时间点自身比较差异均无显著性。实验组结果见表1。GSH-PX活性随缺血和再灌注的时间延长而逐渐降低。但缺血30min和60min与缺血前比差异无显著性(P>0.05),前二者相比亦无显著差异(P>0.05);再灌注30min和60min与缺血前比有显著差异(P<0.01),与缺血30min和60min相比亦有显著差异(P<0.05,P<0.01);再灌注60min较30min血浆GSH-PX活性也有明显降低(P<0.05)。
5 小肠光镜观察:见再灌注60min时小肠损伤的积分较高,其值与血浆MDA的变化呈正相关(相关方程r=0.874,P<0.05,见图1),但与CAT、SOD、GSH-PX的变化无显著相关关系(P>0.05)。
图1 再灌注60min血浆MDA含量与chill,s积分值关系 讨 论 在小肠缺血再灌注过程中,可通过多种途径产生大量自由基。自由基的来源主要通过:①黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶(XOD),产生大量[1]。本实验结果显示,在肠系膜上动脉夹闭及开放后,缺血和再灌注各时点血浆中MDA含量逐渐升高,且MDA越高肠组织学损伤越严重,呈明显正相关。此结果说明缺血再灌注后MDA的升高,可能是小肠组织损伤的原因之一。再灌注虽然对恢复局部血供、清除有毒代谢产物等有益,但再灌注过程中产生的氧自由基及脂质过氧化物对组织细胞也有较大的毒性和损伤作用。 在正常生物体内存在着清除自由基的各种酶,其中SOD、CAT、GSH-PX起着最重要的作用。本实验结果显示,这些酶的活性随着缺血和再灌注时间的延长而逐渐降低。但其下降的程度有所不同,其中以GSH-PX的下降最为明显。这主要由于动物的细胞内CAT和GSH-PX的分布不一样,CAT主要存在于过氧化体中,GSH-PX则主要存在于胞浆和线粒体的基质中,它们在清除H2O2起着协同作用[2]。而红细胞中所产生的H2O2主要依靠GSH-PX来清除,因此血浆中GSH-PX的下降相对较明显。SOD是一种重要的金属酶,能清除生物氧化所产生的O2而对细胞起到保护作用。再灌注时一方面由于其清除自由基后酶的活性降低,另一方面血流恢复后又可使各种酶被稀释,所以在缺血-再灌注过程中,自由基清除剂(酶)的活性逐渐下降,导致体内活性氧(自由基)堆积,MDA的升高。 脏器的缺血再灌注损伤是一个十分复杂的病理过程,其损伤是双相性的[3]。小肠缺血缺氧可造成细胞能量代谢障碍,毒性和酸性代谢产物堆积,溶酶体酶释放,亚细胞结构破坏,组织细胞损伤。再灌注时虽然恢复局部血供,对损伤组织的修复和清除有毒物质有利,但由于氧自由基的大量产生,在再灌注后短时间内仍可使局部组织的损伤进一步加重,也就是再灌注损伤,甚至可导致远处组织、器官的损伤[4,5]。 近年来,涉及肠系膜上动脉的外科疾病的发生率有增高的趋势[6]。如急性血管闭塞、肠系膜上动脉血栓形成或来源于心脏的栓子栓塞,由于发病急,侧支循环尚未建立,易导致小肠缺血性坏死。另外休克、败血症等使肠道血液灌流不足,引起缺血坏死。这些疾病常常发生于年老体弱者,其脏器功能和对疾病的抵抗力都在不同程度的衰退,因此临床治疗上难度加大。本实验的结果提示,对于这类病人,即使时间较短的缺血后也应想到有继发小肠缺血-再灌注损伤的可能。在恢复血流前可试用抗自由基的措施或药物,如XOD抑制剂、SOD、CAT、GSH-PX等,这将为临床治愈这类疾病提供良好的契机。 参考文献 1金惠铭.微循环与休克.上海医科大学出版社.1993,71~73 2赵世民.医学自由基的基础与临床.山东大学出版社.1993,75~76 3邓美海,陈双,区庆嘉,等.氧自由基在腹主动脉阻断所致内脏缺血再灌注损伤中的作用.中国老年学杂志.1998,18(6):354 4GracePA.Ischemia-reperfusioninjury.BritishJ.Surg.1994,81(5):639 5王迪浔,金惠铭.病理生理学.人民卫生出版社.1994,366 6DemetriadesD,TheodorouD,MurrayJ,etal.Mortallityandprognosticfactorsinpenetratinginjuriesoftheaorta.JTrauma.1996,40(5):761 7ChiuChujeng,AliceH.McArdle,ReaBrown,etal.IntestinalMucosalLesioninLow-FlowStates.ArchSurg.1970,101:478收稿:1999-09-30
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