前言第一部分新生豚鼠海马神经干细胞的培养、鉴定及定量观察目的神经干细胞(neuronalstemcells,NSCs)的研究已逐渐成为国内、外基础及临床医学各专业的重要研究课题。NSCs是一种成体干细胞,存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统的多个区域,属多能干细胞,在一定的微环境中具有自我更新和向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化的能力,且具有极强的可塑性,利用NSCs进行细胞移植治疗或基因治疗有很好的临床应用前景。本实验旨在建立一套完整的方法分离培养豚鼠海马NSCs、定量观察连续传代培养获得的克隆球中NSCs的比例,为进一步分离、纯化NSCs来进行细胞移植治疗提供细胞学帮助和数据依据。方法①应用无血清培养技术,加入EGF和bFGF(终浓度为20μg/L),分离新生豚鼠海马组织进行NSCs的原代、传代培养;用100ml/L胎牛血清对NSCs进行诱导分化培养;将BrdU加入传代培养的细胞培养基中,终浓度为10μg/ml。应用免疫细胞化学技术,行Nestin、BrdU、NF、GFAP和S100染色,鉴定NSCs的增殖能力和多分化潜能。②联合应用免疫细胞化学技术和单细胞...
PartⅠIncubation,identificationandquantitativeassayofhippocampus-derivedneuralstemcellsofguineapigAIMTheresearchofneuralstemcellshasbecomemoreandmoreimportantinmanymedicalfieldsallovertheworld.Neuralstemcells(NSCs)isanadultstemcells.Theyhavethepowerfulplasticityandabilityofrenew.Soitcanbeusedintheresearchofcelltherapyandgenetherapy.TheaimofthisexperimentwastoestablishasuitableculturemethodforNSCsderivedfromhippocampuso...