基质金属蛋白酶14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

　2.4MMP14和EMMPRIN在Rb中表达水平的关系

　　对MMP14和EMMPRIN在Rb中的表达水平进行Spearman等级相关分析，Rb组织中EMMPRIN与MMP14的表达强度呈正相关关系（r=0.877,P＜0.01）。

肿瘤侵袭和转移的基本过程是瘤细胞从原发瘤脱离后侵犯周围和（或）远处组织,涉及瘤细胞穿过细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）屏障、血管壁的基底膜,以及穿出血管壁进入宿主微环境的过程。ECM是肿瘤侵袭和转移的重要组织屏障。基质金属蛋白酶对基底膜中细胞外基质的降解是肿瘤浸润和转移的关键步骤之一。MMP14作为基质金属蛋白酶家族（matrixmetalloproteinases,MMPs）中的重要一员，不但是前体MMP2（proMMP2）的细胞表面激活因子,使之激活后具备了降解ECM的能力，而且可以直接赋予无侵袭潜能的细胞穿透I型胶原的能力,且此过程不依赖proMMP2的激活［2］。同时，它还能够通过降解层粘连蛋白5而暴露可以启动内皮细胞移动能力的关键序列，从而有利于肿瘤细胞的浸润转移［3］。EMMPRIN是由肿瘤细胞产生的一种跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族中的一员，可通过肿瘤细胞与肿瘤间质中成纤维细胞间的相互作用促进成纤维细胞分泌MMP1、MMP2和MMP14,也可通过肿瘤细胞与肿瘤细胞间的相互作用促进肿瘤细胞分泌MMP2，对ECM进行降解，促进肿瘤细胞的浸润转移［4］。同时，它也可以通过一种旁分泌的方式作用于血管内皮细胞，通过调节内皮细胞MMPs的产生而参与肿瘤新生血管生成［56］。此外，MMP14和EMMPRIN还可以上调肿瘤中血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的表达水平，有利于肿瘤的血管新生，促进肿瘤的浸润转移［78］。本研究初步探讨了MMP14和EMMPRIN在视网膜母细胞瘤中的表达及意义。

本实验通过免疫组化研究显示,MMP14和EMMPRIN在Rb组织中的阳性表达率分别为87.18%和84.62%，青光眼期Rb中MMP14和EMMPRIN表达的灰度值明显低于眼内期（P＜0.01及P＜0.05），眼外期明显低于青光眼期（P＜0.01及P＜0.05），视神经浸润组中二者表达的灰度值明显低于无视神经浸润组（P＜0.01及P＜0.05），提示了MMP14和EMMPRIN的高表达可能与Rb的侵袭转移能力增强及肿瘤的预后不良有关。Adithi等［9］运用免疫组化和免疫印记法对60例Rb进行检测，发现EMMPRIN的阳性表达率为64%，同时伴有MMP2和MMP9的高表达（66%和61%）以及TIMPs的低表达；在发生转移的Rb中EMMPRIN强阳性表达（3+）率为39%，而在未发生转移的病例中仅为3%，认为在Rb中EMMPRIN对MMP2的表达具有上调作用，且二者在肿瘤的浸润转移中起着重要作用。其结果与本实验结果一致都发现了Rb中EMMPRIN的高表达。在其它与Rb一样来源于神经外胚层的肿瘤中,发现MMP14的变化与本实验结果类似。如在人脑胶质细胞瘤中高级别胶质瘤组织（Ⅲ～Ⅳ）中MMP14和MMP2的阳性表达率显著高于低级别胶质瘤组织（Ⅰ～Ⅱ）,在单因素生存分析中,MMP14的表达与患者预后不良有关,提示MMP14的表达水平与肿瘤的恶性程度及侵袭能力有关［10］。本实验结果还表明，尚有部分Rb病例不表达MMP14或EMMPRIN，二者的阴性表达率分别为12.72%和15.38%，而其原因尚不清楚。　　本实验通过对MMP14和EMMPRIN在Rb中的表达水平进行比较显示，Rb组织中EMMPRIN与MMP14的表达强度呈正相关关系（P＜0.01），提示二者可能在Rb的发生发展中同步升高，共同促进Rb的浸润转移。在其他肿瘤中也发现了MMP14和EMMPRIN的高表达。如Nabeshima等［11］通过对周围神经鞘瘤的研究发现，MMP14和EMMPRIN在恶性神经鞘瘤中的阳性表达率明显高于良性神经鞘瘤，认为二者与神经鞘瘤的恶性程度可能具有潜在的关联性，对其浸润转移起促进作用。MMP14和EMMPRIN不但有着各自的促进肿瘤浸润转移的机制，同时二者可分泌和激活MMP2，使其具备了降解ECM的能力对ECM进行降解，以及二者可上调肿瘤中VEGF的表达水平以利于肿瘤的血管新生，这些可能都是MMP14和EMMPRIN共同促进Rb浸润转移的机制。MMP14与EMMPRIN之间也存在相互作用,从而维持其在恶性肿瘤中的表达水平。作为基质金属蛋白酶诱导因子，EMMPRIN可通过刺激肿瘤基质中的成纤维细胞分泌MMP14,使其在恶性肿瘤中的表达水平升高,从而促进肿瘤的浸润转移［12］。此外，Egawa等［13］通过研究发现，体外培养的人类肿瘤细胞HT1080和A431可以向培养基中释放一种分子量为22kDa的EMMPRIN片断，此种释放与肿瘤细胞中MMP14水平密切相关，他们将其称为“MT1MMP依赖性劈裂”。此片断具有维持EMMPRIN蛋白功能和上调人成纤维细胞MMP2表达水平的作用，而下调这种肿瘤细胞中的MMP14水平可以抑制EMMPRIN片断的释放，使EMMPRIN的表达水平降低。可见，MMP14也可对EMMPRIN在恶性肿瘤中的表达水平产生影响。

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