两种剂型脊髓灰质炎疫苗的热稳定性观察
中国计划免疫2000年第2期第6卷论著
作者：姜晓路卢亦愚严菊英
单位：浙江省卫生防疫站，杭州310009
关键词：脊髓灰质炎糖丸疫苗；脊髓灰质炎液体疫苗；热稳定性
摘要：为了研究脊髓灰质炎液体疫苗和糖丸疫苗对热冲击后的稳定性差异，对37℃孵箱放置不同天数后的两种疫苗分别测定了效价，在－20℃保存下效价为5.9logTCID50／粒的糖丸疫苗，37℃放置1天后其效价明显下降，到5天后降为0；而在－20℃保存下效价为5.7logTCID50／0.1ml的液体疫苗，37℃放置3天后仍能维持在5.5logTCID50／0.1ml左右。实验证明：脊髓灰质炎液体疫苗不仅具有与糖丸疫苗同样良好的免疫效果，且具有质量可靠、热稳定性好等的综合优势，更适合我国使用。
中图分类号：R512.4文献标识码：A
文章编号：1006－916X（2000）02－0080-02
ObservationontheThermostabilityoftheTwoFormsofPolioVaccine
JIANGXiao-lu,LUYi-yu,YANJu-yingZhejiang
ProvincialEpidemicPreventionStation,ZhejiangProvince,Hangzhou310009,China
Abstract:Inordertostudythethermostabilitybetweenliquidformpoliovaccineandpoliovaccinedragee-candy,thetitersofthevaccinesplacedat37℃fordifferenttimesweretested.Thetiterofpoliovaccinedragee-candywhichwas5.9logTCID50perpillat-20℃decreasedobviouslyafterplacedat37℃foroneday,anddecreasedto0after5daysin37℃.Thetiterofliquidformpoliovaccine,itstiterwas5.7logTCID50/0.1mlat-20℃,decreasedto5.5logTCID50/0.1mlafterplacedat37℃for3days.Thetestsshowedthatliquidformpoliovaccinehadnotonlythesameimmuneeffectasthatofpoliovaccinedragee-candy,buthadsuperiorityingoodqualityandthermostability.TheliquidformpoliovaccineismoresuitableinChina.Inordertostudythethermostabilitybetweenliquidformpoliovaccineandpoliovaccinedragee-candy,thetitersofthevaccinesplacedat37℃fordifferenttimesweretested.Thetiterofpoliovaccinedragee-candywhichwas5.9logTCID50perpillat-20℃decreasedobviouslyafterplacedat37℃foroneday,anddecreasedto0after5daysin37℃.Thetiterofliquidformpoliovaccine,itstiterwas5.7logTCID50/0.1mlat-20℃,decreasedto5.5logTCID50/0.1mlafterplacedat37℃for3days.Thetestsshowedthatliquidformpoliovaccinehadnotonlythesameimmuneeffectasthatofpoliovaccinedragee-candy,buthadsuperiorityingoodqualityandthermostability.TheliquidformpoliovaccineismoresuitableinChina.
Keywords:Poliovaccinedragee-candy;Liquidformpoliovaccine;ThermostabilityPoliovaccinedragee-candy;Liquidformpoliovaccine;Thermostability
口服脊髓灰质炎（脊灰）减毒活疫苗（OPV）是世界卫生组织（WHO）在全球扩大免疫规划（EPI）使用的主要疫苗之一，在我国消灭脊灰工作中起到了关键的作用。我国除了以往常用的糖丸剂型外，目前也正在开发液体剂型的疫苗。为了探讨两种疫苗的热稳定性，将本实验室－20℃保存的效期至1995年的液体疫苗与1997年的糖丸疫苗进行比较，现将结果报道如下。
材料与方法
1疫苗糖丸疫苗由中国医学科学院医学生物学研究所提供，批号为97－1－10，效期至1999年1月；液体疫苗由Lyon－France生产，批号为J5936，有效期至1995年12月，我们分别在1995年、1996年和1997年3次对该批号液体疫苗进行的追踪观察滴定，其效价均在5.5logTCID50／0.1ml左右，稳定性很好。由此出发，我们将其与当年的糖丸疫苗进行了热稳定性冲击试验。
2疫苗的热稳定性试验两种剂型的OPV在到达省卫生防疫站后均置－20℃保存，然后将糖丸疫苗和液体疫苗各分为7组，每组3个重复（即糖丸疫苗每组3袋，每袋10粒；液体疫苗每组3瓶），将其中6组疫苗均放置于37℃孵箱，分别放置1天、3天、5天、7天、10天和15天，并将置－20℃冰箱保存的两种疫苗作为0天计算。上述6组疫苗处理完毕后均放回－20℃保存，待测定。
3疫苗效价测定参照卫生部《计划免疫技术管理规程》（1987年4月），用微量细胞病变法测定疫苗的总滴度，并采用Karbar法计算疫苗的效价TCID50。
Xm：所用病毒最高浓度稀释度的对数
d：稀释度系数（倍数）的对数
ΣPi：每个稀释度出现细胞病变的百分数总和
结果
1两种剂型OPV在37℃放置不同时间后的平均效价
从表1可见，液体疫苗与糖丸疫苗在－20℃保存0天时两者的平均效价基本相同，无显著性差异（P＞0.05）；而当两种疫苗在37℃放置1天后，糖丸疫苗的效价急剧下降，而液体疫苗未有大的变化，两者有极显著性差异（P＜0.01）。
表1两种疫苗37℃持续不同时间后的平均效价
天数013571015糖丸疫苗（logTCID50／粒）5.92.90.70000液体疫苗（logTCID50／0.1ml）5.75.65.53.12.90.80.8
2两种剂型OPV在37℃放置不同时间后的效价差异
糖丸疫苗在37℃环境下其效价随保存时间的延长而直线下降，保存1天后就下降达一半之多，与37℃保存前存在极显著差异（P＜0.01），3天降到0.7logTCID50／粒，5天下降到0。而液体疫苗在37℃保存0～3天其效价无显著变化，仍能维持在5.6logTCID50／0.1ml左右，在5天后才产生极显著差异，15天后还能测到0.8logTCID50／0.1ml左右的效价（附图）。液体疫苗放置不同时间后的效价变化情况，经统计学处理后如表2〔1〕。
附图两种疫苗效价在37℃的热稳定性比较
表237℃放置不同时间后液体疫苗效价
均数间的两两比较
时间
（天）效价
logTCID50／0.1ml－0.9－0.8－2.9－3.1－5.5－5.605.74.8＊4.9＊2.8＊2.6＊0.20.115.64.7＊4.8＊2.7＊2.5＊0.135.54.6＊4.7＊2.6＊2.4＊53.12.2＊2.3＊0.272.92.0＊2.1＊100.80150.8
注：＊表示两者有极显著性差异。讨论
OPV目前有糖丸与液体两种剂型，世界各地在早期大多使用减毒的糖丸疫苗，我国从1963年就开始使用糖丸疫苗，在长期的使用过程中，其预防接种效果良好，服用方便，被接种儿童的抗体阳转率较高，在我国消灭脊灰工作中起到了关键作用。另一种是不久前开发的液体疫苗，近年来我国从国外引进了液体疫苗，据国内有关专家论证，不仅其免疫效果很好，且具有热稳定性好、质量可靠的特点，与糖丸疫苗相比较更适合于0～8月龄的婴儿服用〔2，3〕。
从本次实验结果看，放置37℃的液体疫苗热稳定性明显好于糖丸疫苗，因此我们认为液体疫苗在长时间的冷链保存与运输过程中，或在冷链短时间遭到破坏时，对其效价影响不会很大。据有关文献报道，糖丸疫苗的工艺与质量尚不能完全达到WHO的要求标准，尤其在热稳定性上尚有不足之处。我国幅员辽阔，南方又属亚热带气候，山地、草原等在国土中所占比例较大，而计划免疫的接种方式又多种多样，因此保证接种疫苗的质量是一个很关键的因素，对于糖丸疫苗来讲，由于对保存和运输的冷藏条件要求较高，给基层尤其是边远地区的预防接种带来一定困难，而液体疫苗根据我们的实验结果及文献报道均已证实，其热稳定性远远高于糖丸疫苗，且两者的免疫效果也无差异〔3、4〕。因此液体疫苗更适用于我国儿童计划免疫工作，今后有必要在我国进一步得到开发、推广与应用，为我国的最后消灭脊灰病毒工作做出贡献。
作者简介：姜晓路（1974－），男，浙江省富阳市人，浙江省卫生防疫站病毒学研究所技师，从事病毒学检验工作。
参考文献
〔1〕上海第一医学院卫生统计教研组.医学统计方法［M］.上海：上海科学技术出版社，1987，42～48.
〔2〕徐曼如，赵文彬，郭仁友，等.两种剂型的脊髓灰质炎疫苗基础免疫的血清学效果观察［J］.中国计划免疫，1996，2（3）：111～114.
〔3〕陈英耀，陈洁，金永春，等.特尔斐法对口服脊髓灰质炎疫苗的综合效果评价［J］.中国计划免疫，1998，4（5）：263～267.
〔4〕孔健，丁一新，张连芝，等.不同国家液体型脊髓灰质炎疫苗热稳定性及免疫原性［J］.中华流行病学杂志，1993，14（3）：151.
收稿日期：1999－06－10
修回日期：1999－08－09
（责任编辑：jbwq）
