诊断胰岛素瘤根据典型的whipple三联症诊断多无困难，即：①自发性周期性发作低血糖症状、昏迷及其精神神经症状，每天空腹或劳动后发作者；②发作时血糖低于2.78mmol/l；③口服或静脉注射葡萄糖后，症状可立即消失。但是，有些病人的症状并不典型，可做血糖测定、胰岛素测定、甲磺丁脲（d860）激发试验、胰高血糖素实验、l-亮氨酸试验、钙剂激发试验、血清c-肽测定等都对胰岛素瘤的诊断有帮助，并有助于排除其他低血糖的原因。由于胰岛素瘤瘤体较小，位置不恒定，可做b超、电子计算机断层扫描（ct）、核磁共振（mri）、腹腔动脉造影、选择性门静脉系统分段取血（spvs）、选择性动脉注射美蓝等定位诊断技术的检查，可正确判断肿瘤的位置。
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