再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与白细胞介素8水平检测
临床血液学杂志1999年第6期第12卷论著作者:李府郑立波单位:山东胜利石油管理局胜利医院山东省东营,257055关键词:贫血,再生障碍性;t细胞亚群;白细胞介素-8摘要目的:探讨再生障碍性贫血(再障)的免疫发病机制,阐明t细胞亚群及il-8在再障患者中的变化及临床意义。方法:用单抗试剂盒,采用sap法和双抗夹心酶联免疫吸附法(elisa)对9例再障患者和10例正常人外周血t细胞亚群及血清il-8含量进行测定。结果:再障患者外周血cd3、cd4亚群细胞减低,cd8亚群细胞增高,cd4/cd8降低,再障患者血清中il-8含量明显高于正常对照组。结论:细胞免疫功能异常及造血负调控因子il-8可能在再障发病中起一定的作用。detectionofthecellularimmunefunctionandil-8levelinaplasticanemiapatientslifu,zhengliboshenglihospitalofshenglipetroleumadministrativebureau,dongying,257055abstractobjective:toinvestigatetheroleofcellularimmunefunctionandinterleukin-8inthepathogenesisofaplasticanemia(aa)anditsclinicalsignificance.method:tlymphocytesubsetsintheperipheralbloodmononuclearcells,andthelevelsofil-8intheserumin9aapatientsand10normalcontrolsweremeasuredbysapandelisa.resutl:cd3cells,cd4cellsandcd4/cd8cellswerelower,andcd8cellsandil-8levelswerehigherinaapatientsthaninnormalcontrols.conclusion:thecellularimmunedysfunctionparticipateinthepathogenesisofaa.il-8mayhaveapotentialroleinpathogenesisofaa.keywordsanemia,aplastictlymphocytesubsetsinterleukin-8已有证据表明,细胞免疫功能紊乱参与了造血功能衰竭的病理过程〔1〕,而对造血负调控因素的研究,是目前了解再生障碍性贫血(再障)的成因和机制的热点。我们应用单克隆抗体检测技术和双抗夹心elisa法对再障患者外周血t细胞亚群和白细胞介素8(il-8)进行测定,旨在探讨这些因素在再障发生发展过程中的作用及其临床意义。1病例与方法1.1病例来源再障9例,男7例,女2例,年龄10~54岁,平均33.9岁,均为我院住院初诊患者,诊断符合文献标准〔2〕。正常对照组:10名,男女各5名,年龄18~24岁,平均21.3岁。分离单个核细胞用于t细胞亚群检测,分离血清,-20℃冻存用于il-8的检测。1.2实验方法t细胞亚群检测试剂盒购自北京中山生物技术公司,采用sap法。il-8检测试剂盒购自深圳晶美生物技术公司,采用双抗夹心酶联免疫吸附法(elisa)。其操作按试剂盒说明进行。1.3统计学处理再障患者组与正常对照组t细胞亚群及il-8比较采用样本均数的t检验,以p<0.05为差异有显著性。2结果2.1再障患者组与正常对照组t细胞亚群的比较10例正常对照组cd3、cd4亚群细胞分别为(67.70±4.37)%和(44.40±4.09)%,9例再障患者组cd3、cd4亚群细胞分别为(59.67±7.42)%和(30.78±3.63)%,再障组明显低于正常对照组(p值分别<0.005,<0.001);而正常对照组cd8亚群细胞为(23.30±2.91)%,再障患者组为(28.89±4.96)%,显著高于正常对照组(p<0.005);再障患者组cd4/cd8比例明显降低(1.08±0.18vs1.94±0.32,p<0.001)。2.2再障患者组与正常对照组il-8水平的比较正常对照组il-8含量为47.80±23.69ng/l,而再障患者组il-8含量为499.95±229.46ng/l,显著高于正常对照组(p<0.001)。3讨论再生障碍性贫血是一组以造血组织功能衰竭为特征的综合征,其病因及发病机理尚不明确。近年来研究发现,细胞免疫紊乱参与再障的发病,认为再障患者外周血中t细胞亚群失衡〔2〕。主要表现为cd8细胞功能亢进,且异常激活的cd8细胞能抑制造血。我们通过对再障患者细胞免疫功能检测发现,再障患者cd8细胞亚群升高,cd4细胞亚群降低,支持再障患者t细胞亚群失衡的观点。我们发现再障患者组cd3亚群降低,这与文献报道不符〔3〕,可能与所用试剂及实验方法不同有关。细胞因子对造血的调节是当前血液学研究的热点之一,其中造血负调控因素与再障的关系已越来越引起中外学者的重视。再障患者除cd8细胞亚群功能亢进外,白细胞介素-2(il-2)、干扰素(ifn)、肿瘤坏死因子(tnf)等造血负调控因子水平升高,这些异常均可抑制造血〔4〕。il-8是细胞趋化因子家族的成员之一,在正常人体中的含量甚微。近年研究发现il-8与造血有关,对造血干/祖细胞有抑制作用,从而影响造血。我们的研究表明,再障患者il-8水平明显高于正常对照组。由于il-8对造血干/祖细胞有抑制作用,再障患者体内升高的il-8可能参与了再障骨髓造血衰竭的病理过程,也或进一步加重了此过程。通过对再障患者细胞免疫功能及细胞因子检测,可进一步明确再障的成因及发病机制,而且在实践上也能直接指导再障的诊断、治疗,为临床再障患者给予免疫治疗提供了理论依据。免疫异常型再障给予免疫调节,常可收到意想不到的疗效。参考文献1mentzelu,vogeth,rossolr,etal.analysisoflymphocytesubsetsinpatientswithaabeforeandduringimmunosuppressivetherapy.annhematol,1993,66:127~1272maciejewskijp,hibbsjr,andersons,etal.bonemarrowandperipheralbloodlymophocytephenotypeinpatientswithbonemarrowfanure.exphematol,1994,22:1102~11043王欣,张明珙,宋素琴等.再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究.中华血液学杂志,1998,19(4):181~1834邵宗鸿.深入开展再生障碍性贫血的基础及临床研究.中华血液学杂志,1998,19(4):173~175(1999-03-16收稿1999-08-08修回)(责任编辑:jbwq)