t细胞性淋巴瘤组织cd56的检测及其与eb病毒的关系
中华病理学杂志1998年第4期第27卷*论著*
作者：江庆萍周慕珩林汉良侯景辉
关键词：淋巴瘤；t细胞；疱疹病毒4型；人；免疫组织化学；原位杂交
【摘要】目的探讨t细胞性淋巴瘤（tcl)中cd56的表达情况及cd56阳性表达同爱波斯坦－巴尔病毒（epstein-bavius,ebv)感染的关系。方法对46例tcl进行cd56的免疫组织化学lsab法检测及ebes的原位杂交检测。结果（1）46例tcl中8例cd56阳性（17.4％），其中鼻腔、咽部和口腔阳性率最高（5/17例，29.4％）。弥漫性大细胞型淋巴瘤cd56阳性率最高（6/16例，37.5％)。（2）46例tcl中24例ebes阳性（52.2％）。（3）8例cd56阳性病例中，4例ebes阳性。结论cd56的表达同tcl发生部位和类型有一定关系。cd56阳性表达与eb病毒感染未发现相关性。
thedetectionofcd56int-celllymphomaanditselationshipwithepstein-baviusjiangqingping,zhoumuheng,linhanliang,etal.depatmentofpathology,sunyat-senunivesityofmedicalsciences,guangzhou510089
【abstact】objectivetoinvestigatetheexpessionofcd56andtheelationshipbetweencd56positiveexpessionandebvinfectionint-celllymphoma(tcl)inguangdongpovince.methodsimmunohistochemistywasusedtodetectcd56andinsituhybidizationwasusedtodetectebein46casesoftcl.esults(1)17.4%(8/46)tclweecd56positive.accodingtothesiteofoigin,thetcloiginatedfomthenose,phaynxandoalcavityhadthehighestcd56positiveate(5/17,29.4%).anyhow,accodingtothetypepatten,thediffuselagecelllymphomahadthehighestcd56positiveate(6/16,37.5%).(2)52.2%(24/46)ofthetclweeebepositive.(3)4/8casesofthecd56positivetclexpessedebe.conclusionthefindingssuggestthattheexpessionofcd56intclwaspossiblyelatedtooiginalsitesandtclsubtypes.ebvinfectionwasnotelatedtocd56positivetclinthisstudy.
【keywods】lymphoma,t-cellhepsvius4,humanimmunohistochemistyinsituhybidization
近年来，国外一些学者发现，eb病毒感染的t细胞性淋巴瘤(tcl)常表现出一种不同于其它tcl的特殊免疫表型cd2阳性、cd3阴性、cd56阳性，并认为tcl中eb病毒感染和cd56阳性表达有密切关系。我们采用免疫组织化学法检测cd56和原位杂交法检测ebes，探讨tcl中cd56的表达情况及cd56阳性表达同eb病毒感染的关系。
材料与方法
1.标本来源：收集本教研室及中山医科大学附属肿瘤医院病理科1990～1997年存档tcl活检蜡块46例。包括淋巴结内13例，淋巴结外33例。在淋巴结外，鼻腔、咽部和口腔17例，胃肠8例，其它部位8例。
2.试剂方法：(1)免疫组织化学法：采用链菌素抗生物素蛋白－辣根过氧化物酶（lsab）法检测cd56（monosan公司，mon1006），经微波预处理13分钟和一抗4℃过夜。阳性对照用已知cd56阳性的tcl。(2)原位杂交法：探针为异硫氰酸荧光素（fitc）标记的脱氧寡核糖核酸（dako，y017）。主要步骤为：0.1mg/ml蛋白酶k于37℃消化30分钟，95％酒精脱水，滴加ebes探针5～10μl于37℃杂交2小时，50μl碱性磷酸酶偶联的抗fitc（dako公司，k0046）37℃孵育30分钟，bcip/npt显色，甲基氯复染。阳性对照为已知ebes阳性的tcl。
结果
1.组织学分型：按wokingfomulation分类，淋巴母细胞型淋巴瘤（lb）6例，免疫母细胞型淋（ibl）1例，弥漫性大细胞型淋巴瘤（dl）16例，弥漫性大小细胞混合型淋巴瘤（dm）22例，小细胞型淋巴瘤（sl）2例。46例均经免疫组化染色证实为t细胞性淋巴瘤，即uchl1阳性，l26阴性。
图1t细胞淋巴瘤，瘤细胞cd56阳性位于细胞膜上，呈棕黄色lsab法×100图2t细胞淋巴瘤，ebes阳性，细胞核呈蓝紫色颗粒原位杂交×200
2.cd56表达情况：46例tcl中8例cd56阳性。阳性信号为细胞膜显示棕黄或棕褐色颗粒（图1）。在部位上，13例淋巴结内tclcd56均阴性，33例结外tcl中8例cd56阳性，统计学分析（χ2检验），p＜0.05。在结外，鼻腔、咽部和口腔cd56阳性率最高（5/17例，29.4％），其次为胃肠（2/8，25％），另有1例cd56阳性病例为纵隔tcl。在类型上，8例cd56阳性病例中，dl6例（6/16例，37.5％），为阳性率最高；dm、sl各1例，而lb、ibl无cd56阳性表达。
3.cd56同ebes阳性表达情况比较：46例tcl中24例ebes阳性（52.2％），阳性信号为细胞核内呈紫蓝色颗粒着色（图2）。同cd56的表达情况进行比较，仅有4例tcl的cd56和ebes共同阳性。相关性比较(p＞0.05)，说明ebes和cd56表达无相关性；差异性检验(p＜0.05),说明ebes阳性表达明显高于cd56。
讨论
cd56是神经细胞粘附分子（neualcelladhesionmolecule,ncam）的一个异构体。ncam是最早提取、鉴定和克隆的免疫球蛋白超分子家族。其仅由一个基因编码定位于11q23，至少有24个外显子组成，通过mna剪接产生不同异构体，分子大小取决于羧基端的长度。根据其所含2－（2，8）多聚唾液酸单位的多少，分为高唾液酸化的ncam－h型，与低唾液酸化的ncam－l型。高唾液酸化可形成碳水化合物屏障，减少接触介导作用，降低细胞粘附力，可能与肿瘤侵袭行为有关［1］。cd56是一种能被抗leu-19、nkh-1单克隆抗体识别的糖蛋白，含有175000－185000分子量，n端连有丰富唾液酸，主要表达于人类nk细胞上及少数介导人类主要组织相容性抗原非限制性细胞作用的t淋巴细胞上，序列免疫沉淀法证明cd56同表达于神经母细胞瘤上的ncam分子有类似的结构，提示cd56可能同神经细胞上的ncam有类似功能，即介导细胞粘附作用［2，3］。近年来，一些国外文献报道eb病毒感染的结外tcl同cd56阳性表达有密切联系。
本研究中，cd56阳性表达同eb病毒感染相比较，仅有4例cd56和ebes均阳性（3例为鼻腔和鼻咽部，1例为阑尾）。经统计学分析表明tcl中cd56和ebes表达未发现相关性，ebes阳性率（52.2％）远高于cd56阳性率（17.4％）。haabuchi等［4］和tsang等［5］分别报道鼻部tcl的eb病毒感染与cd56阳性有100％相关性。至于鼻部以外tcl，eb病毒感染与cd56阳性表达的关系则意见不一。tsang和clain［5］报道15例鼻部以外cd56阳性tcl病例中10例ebes阳性（66.7％）及9例tcl的cd56和ebes均阳性（100％）。他认为不管在淋巴结外任何部位，有cd2阳性、cd3阴性、cd56阳性这样免疫表型的tcl就会表现出同eb病毒密切的关系［5］。nakamua等［6］报道10例cd56阳性的非呼吸道tcl中，只有3例ebes阳性（33％），表现出ebes阳性和cd56阳性的不一致性。并认为这是由于tcl的部位限制性（site-esticted）导致的。本研究结果显示发生于鼻部及鼻部以外的tcl的cd56阳性表达同eb病毒感染均表现出高度不一致性。其原因有待进一步探讨。另外，本研究发现tcl中cd56阳性表达可能同tcl发生部位和类型有一定关系。
参考文献
1cunninghama,hempelyj,muaya,etal.neualcelladhesionmolecule:stuctue,immunoglobulin-likedomains,cellsufacemodulation,andaltenativenasplicing.science,1987,236：799-806.
2laniell,testi,bindlj,etal.identityofleu-19(cd56)leukocytediffeentiationantigenandneualcelladhesionmolecule.jexpmed,1987,169：2233-2238.
3nittat,yagitah,satok,etal.involvementofcd56(nkh-1/leu-19antigen)asanadhesionmoleculeinnatualkille-tagetcellinteaction.jexpmed,1989,170：1757-1761.
4haabuchiy,imais,wakashimaj,etal.nasalt-celllymphomacausallyassociatedwithepstein-baviusclinicopathologicphenotypic,andgenotypicstudies.cance,1996,77：2137-2149.
5tsangwy,clainjk.ebvandt-celllymphoma.histopathology.1994,25：501-502.
6nakamuas,sasajimay,koshikawat,etal.inconsistentassociationofepstein-baviuswithcd56(ncam)-positiveangiocenticlymphomaoccuinginsitesothethantheuppeandloweespiaytact.pathology,1996,28：111-120.
(收稿：1997-08-18修回：1998-04-11)
参考文献
1whatonl.twocasesofsupenumeayovayandoneofaccessayovaywithaanalysisofpeviouslyepotedcases.amjobstetgynecol,1959,78：1101-1119.
2cuikshanksh,vandiedm.supenumeayovaies:updateandeview.obstetgynecol,1982,60：126-129.
3pintzjl,choatejw,townespl,etal.theembyologyofsupenumeayovaies.obstetgynecol,1973,41：246-252.
(收稿：1997-10-16修回：1998-04-07))
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