前言目的 研制快速、特异、灵敏的检测霍乱弧菌基因芯片。方法 选择霍乱弧菌特异的编码外膜蛋白的ompW基因和毒素ctxA基因,设计引物和探针,并制备检测芯片,通过2次PCR扩增,制备荧光标记的靶序列,并与芯片进行杂交,检测霍乱弧菌和非霍乱弧菌病原体。结果 所有霍乱弧菌菌株在采用单一和多重PCR2种方法制备的荧光标记靶序列与芯片杂交,均在芯片相应探针处出现阳性信号,非霍乱弧菌菌株杂交结果均为阴性。结论 霍乱弧菌基因检测芯片的研制,为霍乱弧菌感染的诊断提供了准确、快速、灵敏的方法,还可选择更多的基因位点设计探针以提高检测的可靠性,可以达到高通量、集成化和自动化的要求。
ObjectiveRapidspecificandsensitiveDNAmicrochipsareusedfordetectionofvibriocholerae.MethodsPrimersandspecificprobesweredesignedfromvibriocholeraegeneompWandctxA.Thefluorescent-labeledPCRproductswerepreparedbyincorporationofCy3-labeledprimerduringPCRamplificationandwerehybridizedtothemicrochipsfordetectionofvibriocholeraestrainsandnonvibriocholeraepathogens.ResultsPositivesignalwerealldisplayedonthemycrochipsinvibriocholeraestrainswhenus...
