一、实验室检查
除作血常规以了解患者有无贫血外，尚可根据诊断和鉴别诊断需要进行其它各项化验检查，其中大便潜血试验，结肠癌生物学标记物的检测等对早期诊断结肠癌，具有积极的意义。
1、便潜血试验
由于结肠癌常因粘膜糜烂溃疡而呈现不同程度的出血，因此可利用简便易行的便潜血试验监测结肠癌。早期的便潜血试验为化学呈色方法，常用试剂为联苯胺或愈创木脂等，近年来逐渐被特异性更强的免疫潜血试剂所取代。但由于便潜血试验并不能区分癌性和非癌性出血，故目前多用于作为大规模人群结肠癌普查的初筛手段。但少数早期癌亦可呈假阴性结果而致漏诊。
2、直肠粘液T抗原试验
又称半乳糖氧化酶试验，是检测结肠癌及癌前病变特异标记物的简便方法，只要将直肠指套上沾液涂抹在特制的纸膜或玻片上，经半乳糖氧化酶反应及雪夫氏试剂显色，便可判断患者肠粘膜是否有T抗原表达。经临床及普查验证该法对结肠癌的检出有较高的敏感性和特异性，将其用于普查，与免疫潜血试验筛检结肠癌有互补效果，但亦存在一定的假阳性和假阴性率。
3、血清CEA的检测
大多数结肠癌患者血清CEA水平常升高，超过50μg/ml。但该试验的特异性并不强，在一些非消化道肿瘤及良性病变，血清水平亦可升高。此外，CEA对早期结肠癌和腺瘤性息肉敏感性较差，因此将其用于早期结肠癌检测，效果并不明显。1982年Magagi等利用人结肠癌细胞系免疫小鼠制备的CA19-9，可以识别有高度癌特异性的唾液神经节苷脂，结果发现19%～49%结直肠肿瘤水平升高。但它对胃胰肝胆管的敏感性更强，作为结肠癌血清学检测，并不比CEA敏感。
其他如结肠癌相关抗原的检测、鸟氨脱羧酶及血清唾液酸含量的测定，白细胞粘附抑制试验等等，研究表明有一定效果，但应用于临床，其特异性、敏感性尚待进一步提高。
二、内镜检查
已在临床普遍推广应用，对有经验的内镜医生常可取常规X线检查。对于高度可疑的结肠癌临床患者尤倡导全结肠镜检查以免漏诊。由于纤维结肠镜安全可靠，不仅能检视肿瘤大小、形态、部位、活动度，且能行息肉或早期微小癌灶切除，对可疑病灶能定向镜取组织进行活检，因此是目前结肠癌诊断最有效的手段。在结肠癌普查中，常作为评价各种初筛检效果的“金标准”。
三、X线检查
可发现直肠镜或乙状结肠镜不能窥视的病损，对于纤维结肠镜难以送达回盲部的患者尤为首先，亦是诊断结肠癌的有效手段。一般均行钡餐灌肠检查，主要征象为粘膜局部变形、蠕动异常、肠腔狭窄、充盈缺损等，对较小的，特别是直径小于2cm的早期癌显示常有困难。采用气钡双重显影，对早期癌的发现有帮助。
四、活体组织检查和脱落细胞学检查
活体组织检查对于确定结肠癌尤其是早期癌和息肉癌变以及对病变鉴别诊断有决定性意义，它不仅可明确肿瘤的性质、组织学类型及恶性程度，而且可判断预后，指导临床治疗。脱落细胞学虽准确性高，但取材较繁琐，不容易获得满意的标本，观察时需要有经验丰富的细胞学医生，故临床应用少，目前多由内镜下直接刷检涂片进行细胞学诊断所取代。
五、其他
如B型超声检查、CT断层摄影、磁共振成像，血管造影，淋巴结99mTc同位素扫描等用于临床结肠癌诊断，效果评价不一。
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