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淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒核蛋白合成基因的表达及应用 应贤平 郁庆明 等

2009-12-02 www.cqvip.com A +

摘  要:目的用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)或其他方法重组蛋白抗原,用于LCMV感染的诊断。方法采用Prosis软件对LCMV核蛋白(Np)全长氨基酸序列进行亲疏水性分析,合成ICMVsRNA第1816-2178位核苷酸序列编码的Np第380-500位氨基酸基因,克隆在His-tagpET-28a融合表达,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化,建立ELISA检测试剂。结果表达产物主要以包涵体形式存在,表达量达20%以上。表达产物经Ni-NTA-Agarose纯化后纯度达到90%以上。经检测93份人血清,有6份病毒抗体阳性,阳性率为6.5%(6/93),与全病毒抗原检测结果7.5%(7/93)相近。结论用合成基因表达产物取代LCMV抗原检测病毒抗体,不仅可以消除病毒传播可能,而且特异性强。为LCMV感染诊断及生物材料质量控制提供有效方法。

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