轮状病毒性肠炎的诊断：主要依据流行病学资料及临床表现进行诊断。
1、流行病学资料根据流行季节、流行地区，出现相似肠道症状患者，应注意轮状病毒性肠炎。
2、临床表现潜伏期较短，起病较急，表现为腹泻，排黄色水样便，部分患儿可伴呼吸道症状。
实验室检查：
1.常规检查血常规：白细胞总数多数正常，少数略为增多，细胞分类中可有淋巴细胞增加。粪便检查：外观为黄色水样稀便，无黏液脓血，镜检多无异常。
2.粪便中病毒、病毒抗原检测电子显微镜检测粪便中的病毒：电子显微镜通过典型形态的观察作出特异性诊断，其阳性率可达90%。本法快速准确，但设备昂贵，操作要求高，故多用于流行病学调查。病毒特异性抗原的检测：许多免疫学方法可用于检测轮状病毒特异性抗原。如酶免疫测定（EIA）、补体结合试验（CF）、免疫荧光（IF）方法等。其中EIA法特异性、敏感性最高，且操作简便。
3.粪便中病毒核酸的检测应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、核酸杂交法及聚合酶链反应（PCR）方法。其中核酸杂交法特异性较高，PCR法敏感性较高，多用于分子流行病学的研究。
4.轮状病毒的血清抗体检测采用EIA等免疫学方法检测患者血清中的特异性抗体。如发病急性期与恢复期双份血清的抗体效价呈4倍增高，则具有诊断意义。
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