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鼻咽血管纤维瘤中血管生成素2的表达及其临床意义|论文下载|研究生论文|博士论文|研

2009-12-09 lw.china-b.com A +

giopoietin2;Immunohistochemistry鼻咽血管纤维瘤的本质是血管错构瘤(vascularhamartoma)[1],虽是良性肿瘤,但破坏颅底骨质及周围软组织结构可导致严重的并发症,其扩展性生长机制有待进一步研究。

Ang是新近才发现的一族蛋白分子、肿瘤分泌的生长因子,能刺激新血管的生长。包括Angl、Ang2、Ang3、Ang44种分子。Ang作用于内皮特异的Tie2受体,维持成熟血管的完整性及静息状态,并参与生理及病理情况下的血管新生。近年发现,Ang在肿瘤血管新生中作用显著。在多种癌组织中均可见到有Ang及其受体表达增加,特别是在肿瘤边缘的新生血管区[24]。目前研究认为,Ang1的表达与肿瘤血管形成的多少关系不大,而Ang2的表达是肿瘤血管新生起始及加强的因素,与肿瘤血管形成数目、临床分期及预后关系密切。作者用免疫组化方法两步法检测Ang2在鼻咽纤维血管瘤(Juvenilenasopharyngealangiofibroma,JNA)中的表达情况,探讨其与JNA血管的发生和肿瘤扩展性生长的关系。

1资料与方法

1.1材料30例鼻咽血管纤维瘤标本来自1998年至2006年福建医科大学附属第一医院病理科和福建省耳鼻喉研究所。

鼻咽血管纤维瘤组30例,男27例,女3例,1044岁,平均19岁。按Chandler等的肿瘤分期标准:Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期18例,Ⅳ期2例。对照组20例标本为在内窥镜下取自鼻咽部慢性炎症的黏膜。4%甲醛固定,24?h内取材,常规石蜡包埋,4?μm厚连续切片。

1.2试剂兔抗人Ang2多克隆抗体购自武汉博士德公司,CD34鼠抗人单克隆抗体和免疫组化Envision试剂盒购自广州基因公司。

1.3免疫组织化学染色操作严格按照说明书进行,用已知阳性片做阳性对照,用PBS代替第一抗体作为阴性对照。免疫组化结果判断[3]:Ang2阳性染色者细胞胞浆有棕黄色颗粒沉着。阳性细胞数:0分为无阳性细胞,1分为阳性细胞数<25%,2分为阳性细胞数占25%50%,3分为阳性细胞数占51%75%,4分为阳性细胞数>75%。染色强度:0分为无染色,1分为弱染色,2分为中等强度染色,3分为强染色。计算各抗体的阳性细胞数和染色强度得分,以37分为阳性。

1.4微血管密度CD34阳性染色定位于血管内皮细胞,呈棕黄色,鼻咽血管纤维瘤组织内孤立的棕黄色血管内皮细胞或细胞簇代表一条单独的微血管。在10倍物镜下挑选微血管分布最高的区域,在400倍光镜下(0.196?mm2/每视野)计数10个高倍视野中被CD34染成棕黄色的血管数目,取其中3个最大值的平均值作为MVD。

1.5统计学处理采用SPSS11.5统计软件包行χ2检验及t检验,必要时用Fisher′s精确概率法,所有结果均以P<0.05为差异有统计学意义。

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