文章内容:2.-/巴陛湖南医学白氩南践留俐色黝强砭应1995年8局急性淋巴细胞性白血病残留细胞的检测及其意义蝴酬醋毳定厂④¨用聚合酶链式反应检测了12例惠一陆淋巴细胞性白血病患者完全缓解期骨髓标本;5例有基固重排,临床随访均在2~3月内复发;7制来发现基因重排,其中2例分别在缓解后3月,8月复发,可能为白血病基固重排发生了变异,其余5例来复发.提示捡测白血病残留细胞有助于提前预测白血痛的复发,指导治疗.关键词白血病聚台酶链式反_应微量残留病急性淋巴细胞性白血病()经化疗等综台1,2方法用苯酚,氯仿提取骨髓标本中并治疗后,大部分患者可获得完全缓解,然而,本病缓测定其含量参照等建立的方法进行操作解后容易复发.体内少数残留白血病细胞()斗引物由天津第二医学院挺供,细胞引物用于扩是造成白血病复发的主要根源之一.因此,如何检测增-基因片段,细胞引物用于扩增细胞和消除,最终治愈白血病已日益引起人们的重受体7基因重排所产生的片段.在50#1反应视.我们自1991年7月至1993年6月共收集了12体系中含50的或细胞引物21,样本倒患者完全缓解期骨髓标本,用聚台酶链式反1,4种脱氧核苷酸41.双蒹水34,10×应()技术检测其残留细胞,并进行了临床追缓冲渡51,二甲亚砜2/.将上述反应体系置踪观察,报道如下.扩增仪中,95℃变性10,加聚合酶1材料和方法(3/,由北京华美公司提供),沿管壁加适量1.1检铡对象患者完全缓解期骨髓标本12石蜡袖,再在93℃,55℃72℃2进行例,年龄14~54岁,其中男性8倒.女性4倒,白变性,退火,延伸,循环30周期.取扩增物1置血病根据标准确诊(7例.25例),辅以细6%聚丙烯酰胺凝腋扳中,进行电泳.溴化己锭液染胞化学染色.完全缓解的标准依据1987年1色后紫外透射仪下观察结果,在(-322月全国白血病化学治疗讨论会制订的标准.正常骨)标志的相应碱基对之间出现沉淀为阳性,否则髓标本2例.急性非辩8细胞性白血病标本3例.为阴性氢酶()或谷胱甘肽氧化酶(-)所清除.故的括性可间接反映体内自由基活动的情况.和0随病程而改变,两者呈负相关.这提示时氧自由基产生与清腺有其内在联系和自身规律.'恢复期及仍未恢复到正常水平.提示临床症状消失后仍应较长时间的治疗和随访.本组有冠脉损害者下降和上升的幅度均火于无嚣脉损害者,说明及改变可作为判断病情和监涮转归的重要指标之一.参考文献左启华主编.儿科学.第3艋,北京:八民卫生出版社1993.350~22黄维嘉.陈宏础,黄天槔.喀苯三酚自氧化抑制法测定^红细胞超氧化物歧化酶.中华医学检验杂志989,2(4):2063丁克祥.血浆紫外吸收法过氧化脂质微量快速测定.中华者年医学杂志19872(1):424丁肚.『崎综合征的免疫学改变临床儿科杂志991,9):335,',3:.,'1!."41990.187:936,,-,1..,-【01984.104:567李树堂.孙丽华,牛进贤,等老年期与老年前期血精过氧化脂质的比较研究中圉腑内与脑外营养杂志1992(2)8(本文承赵样文教授审阅,湖南医科太学附属第二医臃儿科心血管研究室协助统计,致谢).0994430收藕)第12卷第4期1995年8月湖南医【【12埘19952结果见附表附表缓解期骨髓标本中检测结果用技术对12例缓解期骨髓标本(缓解期1~7月)进行检测发现5例基因重排,其中基因重排4例,其扩增物在70~130.7基因重排1例,其扩增带在160,临床随访均在2.-3月内复发.7例未发现细胞受体7和基因重排,其中2侧分别在理解后3月.8月复发,其余5例未复发.正常骨髓标本急性非淋巴细胞性白血病骨髓标本均未发现特异基因重撵带3讨论是指白血病患者经治疗完全埋解后体内仍残留有白血病细胞的状态,此时体内尚存在白血病细胞数0个,它们是白血病复发的根源,一些对复发期肿瘤细胞的研究也进一步证实,这些细胞与发病时的肿瘤细胞来自同一克隆.等"分析了】1例前淋巴细胞白血病初冶与复发时基因重排状况,结果有9例在白血病初次诊断和复发时表现出相同的(免疫球蛋白重链)基因重排,据此,他们认为绝大多数白血病复发是初诊时白血病细胞单克陲增殖的再现.淋巴细胞在分化过程中.免疫球蛋白和基因重排产生独特的序列,检测这些基因重排能作为白血病细胞克隆的特异性标志.41等研究证实大约90%―患者有基因重排目前一些研究资料表明几乎所有的淋巴细胞白血病均发现有基因重排.因此,通过设计引物.扩增和7基因重排序列用于检测白血病残留细胞.本组5倒基固重排均在2--3月内复发.与等报道结果相符,他们认为急性白血病通过化疗获完全理解后.用细胞形态学,免疫学等方法由于其敏感性低不能发现,技术检测的敏感性明显增高,可达10,有助于提前预测白血病的复发,早期发现对于判断治疗效果或制订新的治疗方案是非常有甩的有效地化疗实际上只能捎灭或减少白血病克隆细胞数量到不能发现,等认为检测基因重排能发现亚临床脖性白血病克隆细胞,它将有助于更新的概念.最终可能影响到的治疗【7例未发现有,7基因重排的患者,有2例分别在临床随访3月月复发,可能为白血病基因重排发生了变异,产生了新的或细胞白血病亚型.参考文献1张之南主编.血瘦病诊断及疗效标准.天津.天津科技出版社1991,190~32,,-$985.23(4732):135~43..】.7.:/1109875(5)-735~44,,,/_'.1990,8:43,..,-][刊】.99135189~93(9940610收祷)