p16和PCNA在胶质细胞瘤中的表达及意义

【关键词】胶质细胞瘤

【摘要】目的了解胶质细胞瘤中p16和PCNA表达概况，探寻p16和PCNA在胶质细胞瘤及正常脑组织中的表达差异，初步分析其临床意义。方法通过免疫组织化学法检测胶质细胞瘤及正常脑组织中基因p16和PCNA的表达。结果胶质细胞瘤组织中p16的阳性表达率为52.5%，正常脑组织中p16的阳性表达率为100%，两者比较差异有非常显著性（P＜0.001）。p16的阳性表达与胶质细胞瘤分化有关（P＜0.01）。PCNA在胶质细胞瘤中的高表达率为80%，正常脑组织中未见高表达率。两者比较差异有非常显著性（P＜0.01）。PCNA的高表达与胶质细胞瘤分化有关（P＜0.05）。结论基因p16和PCNA表达异常是胶质细胞瘤产生的机制之一，与胶质细胞瘤的发生及发展有关。

　　【关键词】胶质细胞瘤；基因；p16；PCNA；免疫组织化学法

　　p16andPCNAexpressionprofilesingliomaanditsclinicalsignificance

　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofgenep16andPCNAandtodemonstratetheirexpressiondifferenceingliomaandinnormalbraintissueandtoevaluateitsclinicalsignificance.MethodsImmunohistochemistrymethodswereusedtoanalyzetheexpressionofPCNAandp16ingliomaandinnormalbraintissue.ResultsTherateofp16positiveexpressioninnormalbraintissueandgliomawere100%and52.5%respectively.Therewassignificantdifferencebetweenbrainnormaltissueandglioma　（P＜0.001）,anditwasrelatedtothedifferentiationofglioma.PCNAwashigherexpressioningliomacomparedwithnormalbraintissue（P＜0.001），anditwasrelatedtothedifferentiationofglioma（P＜0.05）.Conclusionp16andmutationPCNAareinvolvedmainlyingliomacarcinogenesis.

　　【Keywords】glioma;gene;p16;PCNA;immunohistochemistry

人脑胶质细胞瘤是威胁人类健康的恶性肿瘤，在我国发病率及死亡率呈上升趋势。此瘤中有多种癌基因激活、抑癌基因失活及其蛋白改变［1］。本研究利用免疫组化检测胶质细胞瘤组织中p16和PCNA的表达，探讨它与胶质细胞瘤发生发展及临床病理因素的关系。

　　1材料与方法

　　1.1材料随机收集我院神经外科2002年1月～2004年10月胶质细胞瘤手术切除组织40例，男26例，女14例。年龄18～62岁，平均39.7岁。胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级18例，Ⅲ～Ⅳ级22例。所有患者在手术后取肿瘤组织用福尔马林固定，石蜡包埋，4μm连续切片，分别做HE及免疫组化染色。所有患者术前未接受过任何放疗、化疗及免疫治疗，术后均经常规组织病理证实。同时收集40例正常脑组织作为对照，取材于外伤、蛛网膜囊肿等非肿瘤患者非功能区脑组织。

　　1.2试剂来源S-P免疫组化试剂盒和p16及PCNA抗体为上海基因有限公司产品。

　　1.3实验方法免疫组织化学法按试剂盒说明书操作，抗原修复采用水煮沸法，用动物血清代替一抗作为阴性对照，用扁桃体组织作为p16阳性对照，用胃癌组织作为PCNA阳性对照。

　　1.4阳性结果判断p16主要在细胞核或在胞膜、胞质中出现棕黄色颗粒为阳性，PCNA组织切片以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。用半定量方法随机选择10个高倍视野计数，p16计算阳性细胞百分比≤10%为（-），11%～25%为（+），26%～50%为（++），＞50%为（+++）。PCNA用增殖指数表示，即PCNA阳性细胞占肿瘤细胞的百分率，并把它分为4级：Ⅰ级为1%～25%；Ⅱ级为26%～50%；Ⅲ级为51%～75%；Ⅳ级为75%以上；其中Ⅰ～Ⅱ级视为弱阳性，Ⅲ～Ⅳ级视为强阳性。

　　1.5统计学方法率的统计学差异显著性采用χ2检验。

　　2.1p16蛋白在胶质细胞瘤中的表达p16蛋白阳性着色定位于细胞核和细胞浆，呈黄色或棕黄色颗粒。在正常脑组织中，染色较深，弥漫分布。肿瘤组织中颜色较浅，范围窄，甚至未见染色。40例正常脑组织中，p16染色阳性率为100%，40例胶质细胞瘤组织中p16阳性表达率为52.5%。与正常脑组织相比，两者差异有非常显著性（P＜0.001），p16蛋白表达与肿瘤组织分化有关（P＜0.05）。见表1。