诺沃克类病毒与腹泻
人嵌环样病毒:札幌类病毒（SLV）.
诺沃克病毒（Norwalkvirus）的感染是成人和大龄儿童流行性非细菌性肠炎的主要病因.四季均可发病.发病后的主要临床表现为疲劳.腹部痉挛.恶心.呕吐.腹疼.腹泻等.儿童以呕吐多见.成人则以腹泻多见,此外还可见寒战.发热.肌肉痛和头痛.少数有眼痛及咳嗽等上呼吸道症状,其症状较轮状病毒轻.腹泻一般为中等量.24小时内约4-8次.稀便至水样便.无脓血.无粘液和白细胞.病程一般为2-7天.为一预后良好的自限性疾病.
诺沃克类病毒的一般特性:该病毒于1968年在美国俄亥俄州诺沃克暴发而被发现.国际病毒分类委员会（ICTV）于1995年发表的第六次病毒分类报告上被划分为脊椎动物病毒（VertebrateVirus）嵌环样（杯状）病毒科（Caliciviridae）诺沃克类病毒属（Norwalk-likeVirus.NLVs）.诺沃克病毒（NorwalkVirus）为其代表种.
诺沃克病毒的毒粒无包膜.为二十面体对称的圆状颗粒.直径约25-35nm.毒粒上有32个杯状的表面凹陷（T=3）.基因组由单分子的正链ssRNA组成.长约8Kb.RNA有感染性.其5′不戴帽.代之以10KD-15KD蛋白与之结合.RNA3′端有多聚（A）尾.其外壳为单一的67KD蛋白分子.其前体蛋白为86KD.在受染细胞中发现有5个病毒编码的蛋白.分子量在29KD-115KD之间.其中115KD和86KD可能是衣壳蛋白的前体蛋白.
诺沃克病毒对热和酸稳定.对乙醚有抵抗力.在pH2.7的条件下3小时.20%乙醚18-24小时或加热至60℃30分钟仍具有传染性.在氧化铯中的浮力密度为1.34-1.41×103kg/m3.免疫电镜下病毒颗粒被抗体包围.因此多数电镜照片显示病毒结构不清.电泳分析仅含单一的蛋白质分子.
诺沃克类病毒的流行病学:目前一般认为诺沃克类病毒的感染是继轮状病毒之后的人类腹泻的第二大病因.广泛地分布于全世界.主要发生在人群密集区.如医院病房.饭店.军舰.集体宿舍等.该病毒常常可以引起成人和年长儿童肠炎的暴发流行.但极少波及婴幼儿.其传播方式是通过粪-口途径传播.主要是通过污染的水源.食物和人-人密切接触传播.表现为:①各年龄组人群.任何季节.任何地点均可发生,②以水型.食物型或人-人传播,③流行时间长短不一.平均为7天,④发病后72小时约半数病人可检测出病毒.
1996年4月到1997年3月.我国北京的首都儿科研究所.利用杆状病毒表达的诺沃克类病毒衣壳蛋白作抗原.对各年龄组的人群诺沃克类病毒的IgG抗体进行了检测.发现人群中IgG抗体阳性高达89%.其中婴儿阳性率很高.为99%.7-11月龄儿童最低.为41%.一岁龄升高到65%.三岁龄升高到85%.8-9岁龄儿童为100%.这一调查结果反映了诺沃克类病毒的感染在人群中是很普遍的.
1982年美国纽约州因生食贝类（Shellfish）而暴发了一次胃肠炎的流行.后经调查发现因为病人食用了蚌（Clam）和牡蜊（Oyster）所致,并且在病人粪便和上述贝类标本中同时检测到了诺沃克类病毒.目前由于生食贝类导致诺沃克类病毒性肠炎已经得到人们的公认.其潜伏期一般为29-32小时.常常于集体食用贝类后暴发.也可呈现散发.
荷兰学者WinH.M等以及英国.日本学者最近的电镜和分子生物学研究结果表明:家畜也可能是诺沃克类病毒的储存宿主.他们分别从养猪场.养鸡场.小牛场等取材的家畜粪便中随机采样.用人诺沃克类病毒的特异性引物进行RT-PCR检测.发现有44%的小牛粪便.2%的猪粪便的检测结果为阳性.同时在电镜下在一份猪的粪便标本中发现了符合诺沃克病毒形态学特征的病毒颗粒.并且他们的系列分析的结果表明:人诺沃克类病毒与家畜诺沃克类病毒的同源性较强,他们认为家畜也是诺沃克类病毒的正常宿主.并且人与家畜之间的交叉传播是可能的.人诺沃克类病毒所致肠炎的流行也有可能来源于动物宿主的机会传播.
分子生物学的研究结果还表明:人嵌环样病毒至少可以分成3个基因群GGI.GGII和GGIII.前二者为诺沃克类病毒（NLV）.第三者为札幌类病毒（SLV）.每一个基因群又包括多种变异毒株.这种高度的变异又导致诺沃克类病毒至少有13个基因型,而其中的数种基因型可同时在人群中传播.并导致人群中肠炎的散发和暴发.然而.大部分的暴发流行通常是由单一基因型的诺沃克类病毒所引起.
诺沃克类病毒的分子生物学:由于缺乏细胞培养体系和动物模型.给诺沃克类病毒的科研工作带来很大的困难.但在过去的十年.人们对诺沃克病毒的研究还是取得了很大的进展.这主要是分子生物学技术的广泛引用带来的结果.国外的学者在这一方面所做的工作很多.到目前为止.他们已经对100多个可得到的毒株进行了序列分析.并且这一数目还在快速增加.分子生物学技术主要应用于以下几个方面:
（1）利用RT-PCR方法.可以快速扩增病人呕吐物和粪便以及动物粪便中诺沃克类病毒特异性的基因片段.从而达到快速诊断的目的.同时.还可以利用这一方法检测家畜.贝类.以辩明其传播的来源.
（2）通过序列分析.和分子杂交等手段.应用于（前述的）诺沃克病毒的分子流行病学调查.分析本病流行的分子机制.从分子水平上确定其传播的来源.
（3）利用杆状病毒等作载体.插入诺沃克类病毒的外衣壳基因.高效表达其衣壳蛋白作抗原.应用于诺沃克病毒病人的流行病学监测.
样品的收集和处理:主要收集病人呕吐物和粪便.家畜粪便.以及市售新鲜海产品贝类动物.
本病潜伏期和排毒时间均很短.病人发病24小时粪便排出诺沃克病毒达到高峰.发病72小时以后.即难以检测出病毒.并且只有1/3-1/2的病人排出病毒.因此.采样宜于发病后24-48小时内进行.
采集好的样品（呕吐物和粪便）以15g/L的浓度溶解于TSB（TryptonSoyaBroth）和10%的甘油中.-70℃冰箱保存.
诺沃克类病毒的检测:
（1）常规血液检查无确诊意义.但对鉴别细菌性肠炎有意义.诺沃克病毒感染时排出病毒的时间短.数量相对较少.故灵敏度低.形态学上亦难以区分.因此电镜（EM）检测一般也不可能获得阳性结果.
（2）免疫电镜（IEM）:本法较为特异.并且在免疫电镜下发现符合形态学标准（如大小和形态）的病毒颗粒被Flewett和Doane等人作为确诊的依据.应用诺沃克病毒的特异性抗体.在免疫电镜下检测人和动物的粪便或呕吐物.可获得阳性结果.但通常情况下阳性率较分子生物学的检测方法低很多.
（3）血清抗体检测:由于人群中普遍存在着诺沃克病毒的IgG抗体.IgG抗体的检测没有诊断意义.但可用于流行病学调查.IgM抗体检测则文献未见报道.抗体检测一般是利用上述杆状病毒等作载体.高效表达其衣壳蛋白作抗原.然后用酶免疫荧光法（EIAs）进行检测.
（4）分子生物学检测:分子生物学的技术和方法.与其他方法相比.有方便快捷的特点.可应用分子生物学的检测方法对病人呕吐物或粪便进行筛选.结合免疫电镜.可确诊是否为诺沃克病毒的流行.预防:可以通过以下几个方面来预防诺沃克病毒性肠炎:
（1）保持良好的个人卫生习惯.饭前便后要洗手.不生食或未煮熟的贝类等海产品.不饮用生水.（2）加强食品卫生的监督管理.提高饮水质量.以阻断其传播,
（3）病人粪便或呕吐物污染过的地方要用1∶50的家用漂白水消毒,立即清洗沾染了的衣物.
（4）患者应就医处理.或逗留家中.以防止传染他人.
